%A 李智方, 冯冲, 纪慧丽, 石宁宁, 宋小凤, 赵勤丽, 龙川, 潘登科, 杨小淦 %T 绿色荧光蛋白在α-1,3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析 %0 Journal Article %D 2015 %J 遗传 %R 10.16288/j.yczz.15-160 %P 1211-1217 %V 37 %N 12 %U {http://www.chinagene.cn/CN/abstract/article_5001.shtml} %8 2015-12-20 %X 猪是人类异种器官移植的理想供体,然而猪-人的异种器官移植会产生剧烈的排斥反应。虽然已制备的α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(Galactosyltransferase gene knockout, GTKO)猪可有效缓解猪-人异种器官移植引起的超急性免疫排斥,但缺少报告基因直观示踪移植后的细胞迁移及器官排斥状态。本文将CAG启动子驱动增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein, EGFP)的表达载体导入GTKO猪耳成纤维细胞,通过体细胞核移植技术制备了EGFP猪。利用双荧光蛋白观测镜、荧光显微镜及定量PCR扩增观察、检测和分析克隆猪各组织器官中EGFP蛋白和转录本的表达状况。结果显示,EGFP蛋白及转录本在克隆猪各组织器官中均有表达,但在肝脏和中枢神经系统中表达较弱。本文成功获得了各组织器官表达EGFP的GTKO猪,为EGFP示踪异种细胞组织移植奠定了基础。