低温变性下复合PCR技术及其应用 |
梁卉,陈国杰,于燕,熊礼宽 |
Co-amplification at lower denaturation temperature-PCR: methodology and applications |
Liang Hui,Chen Guojie,Yu Yan,Xiong Likuan |
图1 Full COLD-PCR和fast COLD-PCR原理图 A:Full COLD-PCR技术原理。DNA95℃高温变性后,降低温度至70℃复性,杂交形成同源双链DNA分子和异源双链DNA分子。由于突变型序列罕见,大部分突变型序列与野生型序列错配形成异源双链DNA分子,具有较低的熔解温度。在Tc温度下变性时,异源双链DNA分子优先解链,随后进行扩增富集。B:Fast COLD-PCR技术原理。基本过程与常规PCR相似,仅将变性温度由高温95℃改为Tc。在Tc温度下,突变型序列由于Tm值低于野生型序列而优先变性和富集。 |
Fig. 1 Schematic view of full COLD-PCR and fast COLD-PCR |
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