利用CRISPR/Cas9和piggyBac实现果蝇基因组无缝编辑

王珏,黄娟,许蕊

Seamless genome editing in Drosophila by combining CRISPR/Cas9 and piggyBac technologies

Wang Jue,Huang Juan,Xu Rui

表1 引物序列信息

Table 1 Primers used in this study

名称 序列(5′→3′) 用途 FW1 CTTGAACGTGTTTCGGTTGT PCR扩增及测序 RV1 CTGAACTGAGCTGGGTGG PCR扩增及测序 FW2 TTCGCACCAACATGATATTACCAA sgRNA质粒构建 RV2 AAACTTGGTAATATCATGTTGGTG sgRNA质粒构建 FW3 GGGCGCGTACTCCACGAATTCAGAACGTTATAGTCTTGTAGCAGGG 5′同源臂构建 RV3 ATAATGTTTCCAATGGTTTTGATTGCGAC 5′同源臂构建 FW4 AAAACCATTGGAAACATTATGTTGGTGACATGTTTGTTACAATTCATGTTCG 5′同源臂构建 RV4 ATATGATTATCTTTCTAGGGTTAAAGCTGTCTTCAGATAC 5′同源臂构建 FW5 CGCAGACTATCTTTCTAGGGTTAAGTGTGCGCTTTTATTT 3′同源臂构建 RV5 GAAGTTATGGTACCGGGTACCACATCATCGAAGTGGAAGCG 3′同源臂构建 FW6 ACTCAAGCGTAGGGAAACAC 跨5′同源臂PCR扩增 RV6 TGAATTGTCGCTCCGTAGAC 跨5′同源臂PCR扩增 FW7 AAATGCACAGCGACGGATTC 跨3′同源臂PCR扩增 RV7 CAGCCCTCAAATGTGGACAC 跨3′同源臂PCR扩增