基于核酸等温扩增的病原微生物微流控检测技术 |
何祥鹏,邹秉杰,齐谢敏,陈杉,陆妍,黄青,周国华 |
Methods of isothermal nucleic acid amplification-based microfluidic chips for pathogen microorganism detection |
He Xiangpeng,Zou Bingjie,Qi Xiemin,Chen Shan,Lu Yan,Huang Qing,Zhou Guohua |
图3 环介导等温扩增原理 A:LAMP外引物F3/B3和内引物FIP/BIP与靶标互补的6个区域,如其中F3与F3c互补,B3与B3c互补;B:起始结构产物生成步骤,引物FIP通过F2区域与模板链F2c结合并进行延伸,之后F3与靶标F3c结合并进行链置换反应,FIP延伸产物被替换释放,释放的单链末端形成环结构(结构3)。BIP和B3以相似的方式进行,生成两端具有环结构的产物5。C:循环放大步骤,结构5以自身为模板,从3°末端F1区域开始自引发DNA合成,同时FIP退火至环状结构中的F2c区域并进行延伸得到结构6。结构6以自身为模板延伸,置换下与结构5互补的产物7。结构7到结构8再到结构5与结构5到结构6再到结构7类似。结构9和结构10分别由结构6和结构8生成。在环状结构与FIP/BIP引物的共同作用下生成含有多个重复靶标序列的结构11、12。参考文献[ |
Fig. 3 Principle of loop-mediated isothermal amplification |
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