基于核酸等温扩增的病原微生物微流控检测技术

何祥鹏,邹秉杰,齐谢敏,陈杉,陆妍,黄青,周国华

Methods of isothermal nucleic acid amplification-based microfluidic chips for pathogen microorganism detection

He Xiangpeng,Zou Bingjie,Qi Xiemin,Chen Shan,Lu Yan,Huang Qing,Zhou Guohua

图6 NASBA反应原理及微流控芯片 A：NASBA扩增原理,含有T7序列的引物1与靶RNA杂交,进行逆转录生成DNA,加Rnase使RNA降解,并加入引物2与DNA杂交延伸,生成双链DNA。由双链DNA经T7 RNA 聚合酶进行转录生成RNA。然后进行循环。最终生成大量RNA经荧光探针进行检测。B：NASBA数字化微流控芯片,首先在干净的芯片通入油相填充真个芯片,再加入反应体系,使反应体系填充至每个小室。由于小室底部通道疏水,因此并不会经小室底部的通道流出。最后再通油相封闭主通道,使每个小室独立分隔。形成数字化液滴芯片。参考文献[44]修改绘制。

Fig. 6 Principles of NASBA and the microfluidic chip