基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗研究进展

基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗研究进展

鲍莉雯, 周一叶, 曾凡一

Advances in gene therapy for β-thalassemia and hemophilia based on the CRISPR/Cas9 technology

Bao Liwen, Zhou Yiye, Zeng Fanyi

表3 CRISPR/Cas9原位修复突变基因的研究

Table 3 In Situ repair of mutant genes using CRISPR/Cas9

突变类型	主要疾病	策略	年份	编辑细胞	编辑基因	修复/编辑效率	脱靶率	编辑后体外细胞表型	参考文献
外显子点突变和移码突变	β-地贫镰状细胞贫血血友病B	HDR^a	2014	β-地贫iPSC	HBB	-28A/G: 7.8% CD41/42 -TCTT: 9.8% 双位点修复效率: 0	未检测到脱靶	HBB mRNA量升高约16倍	[15]
			2015	β-地贫iPSC	HBB	16.67%	未检测到脱靶	HBB蛋白量由0上升至正常水平的~60%	[29]
			2016	β-地贫iPSC	HBB	0.045%	未检测到脱靶	HBB蛋白量接近正常	[28]
			2016	β-地贫iPSC	HBB	na ??ve iPSC组: 57% primed iPSC组: 32%	na ??ve iPSC: 0 primed iPSC: 5%	未说明	[74]
			2017	β-地贫iPSC	HBB	双等位基因修复: 54% 单等位基因修复: 25.5%	未检测到脱靶	有HBB mRNA表达	[30]
			2018	β-地贫iPSC	HBB	2.9%	3个克隆中2个检测到HBD点突变	HBB mRNA和HBB蛋白无明显上升	[32]
			2019	镰状细胞贫血HSPC	HBB	24.5±7.6%	Cas9: 0.1%~36.7% HiFi Cas9^d: ≤0.23%	HbA水平由5.3±1%提升至25.3±13.9%	[31]
内含子点突变	β-地贫	HDR	2018	β-地贫HSC	HBB	8%	未检测到脱靶	未说明	[33]
内含子点突变	β-地贫	NHEJ^b	2019	β-地贫HSPC	HBB	indel产生率: 93%	未说明	HbA分数从36.4%上升至75.6%	[35]
内含子倒位	血友病A	NAHR^c	2015	血友病A iPSC	FVIII	3.7%	未检测到脱靶	F8 mRNA量由0上升至正常水平的50%~120%	[36]