基于CRISPR/Cas9技术的β-地中海贫血和血友病基因治疗研究进展

鲍莉雯, 周一叶, 曾凡一

Advances in gene therapy for β-thalassemia and hemophilia based on the CRISPR/Cas9 technology

Bao Liwen, Zhou Yiye, Zeng Fanyi

表4 基因表达调控: CRISPR/Cas9体外重激活HBG的基础研究

Table 4 Gene expression regulation: basic study on reactivation of HBG by CRISPR/Cas9 in vitro

年份	编辑细胞	编辑方式	编辑效率	脱靶率	编辑后体外细胞表型	参考文献
2015	正常人HSPC	破坏BCL11A红系特异增强子	N/A	N/A	HBG表达水平上升近4倍,分化后HbF⁺细胞占比升高近2倍	[49]
2018	HUDEP-2^a	破坏HBG近端启动子上BCL11A和ZBTB7A结合位点	N/A	N/A	mRNA水平: γ/(γ+β)%比值由不到5%上升至~70% 蛋白水平: HbF水平由0上升至58.7±9.6%	[47]
2018	SCD HSPC^b	敲除13.6kb长的可能的γ-珠蛋白基因抑制因子区域	缺失: 34.1% 倒位: 28.1%	0~4.6%	γ链/类β链的比值较对照上升近2.5倍 0%氧气条件下,镰状细胞数由~65%下降至~30%	[48]
2018	SCD CD34⁺细胞^c	敲除HRI^d	N/A	N/A	mRNA水平: HBG/(HBG+HBB)%比值由3.2%上升至24% 蛋白水平: HbF上升近4倍细胞水平: HbF⁺细胞占比升高近2倍	[53]
2019	β-地贫HSPC	破坏BCL11A红系特异增强子	平均84.4%	未检测到脱靶	HbF/(HbF+HbA+HbA₂)%比值由~30%上升至~70%	[45]
2019	HUDEP-2	破坏HBG近端启动子上BCL11A结合位点	N/A^e	N/A	mRNA水平: γ/(γ+β)%比值由~10%上升至~60% 蛋白水平: HbF/(HbF+HbA)%比值由零上升至~40%	[46]
2020	β-地贫HSPC	破坏HBG近端启动子上BCL11A结合位点	平均85%	未检测到脱靶	γ-珠蛋白的mRNA水平可达α-珠蛋白的126%	[52]