提高CRISPR/Cas9介导的动物基因组精确插入效率 研究进展

李国玲, 杨善欣, 吴珍芳, 张献伟

Recent developments in enhancing the efficiency of CRISPR/Cas9- mediated knock-in in animals

Li Guoling, Yang Shanxin, Wu Zhenfang, Zhang Xianwei

表1 小分子化合物对CRISRR/Cas9介导的KI效率的影响

Table 1 Effect of small molecules on CRISRR/Cas9-mediated KI efficiency

小分子化合物 细胞类型 浓度(µmol/L) 供体模板 KI效率 参考文献 Scr7 (NHEJ抑制剂) 家兔胚胎 40 dsDNA None [2] A549、MelJuSo、小鼠受精卵 0.01、1、1 dsDNA、ssODN 2~19倍 [7] HEK293 1 dsDNA 5倍 [65] hiPSCs 1 dsDNA None [66] HEK293T 10 dsDNA None [71] PFFs 100 dsDNA 1.9倍 [98] HEK293A 1 dsDNA None [102] HEK293T 1 dsDNA 1.8倍 [104] CHO 0.1~20 dsDNA None [108] PFFs 5 dsDNA None [115] 小鼠受精卵 50 ssODN 9.7倍 [120] 斑马鱼胚胎 20 dsDNA、ssODN 2.5~3.7倍 [121] PFFs 1 ssODN None [122] hiPSCs 1 ssODN None [123] L755507 (机理不清楚) hiPSCs 5 dsDNA None [66] PFFs 40 dsDNA 1.9倍 [98] mESCs、HUVEC、 K562、Hela、FCRL-2097、NSCs、hiPSCs 5 dsDNA、ssODN 1.3~8.9倍 [101] HEK293A 5 dsDNA None [102] hiPSCs 5 ssODN None [114] hiPSCs 5 ssODN 1.8倍 [124] hiPSCs NA ssODN None [125] 斑马鱼胚胎 2 ssODN None [126] RS-1 (HDR激活剂) 家兔胚胎 7.5 dsDNA 2~5倍 [2] hiPSCs 10 dsDNA None [66] HEK293A、U2OS 20 dsDNA 3~6倍 [102] 斑马鱼胚胎 20 dsDNA 1.6倍 [121] hiPSCs 1 ssODN None [123] 斑马鱼胚胎 100 ssODN None [126] Nocodazole (细胞周期阻滞) hiPSCs 0.10 dsDNA 1.5倍 [66] HEK293T、HFF、hESCs 0.20 ssODN 提高至38% [99] hiPSCs 1 dsDNA 3.8~5.8倍 [107] HEK293T 0.10 dsDNA、ssODN None [113] PFFs 1 dsDNA 2.8倍 [115]