MDMPR：小鼠发育代谢表型库

朱文静, 刘志玮

MDMPR: Mouse Developmental and Metabolic Phenotype Repository

Zhu Wenjing, Liu Zhiwei

图1 基于突变小鼠胚胎干细胞的敲除策略 “Knockout First” allele (tm1a)是在目的基因内含子中插入一个SA-IRES-reporter片段(含有报告基因lacZ和一个启动子驱动的Neo),lacZ的转录在SA的作用下受目的基因启动子控制,并在polyA处终止,从而达到终止目的基因转录、破坏基因表达的目的。Flp的表达可以删除SA-IRES-reporter片段,将tm1a转变成条件敲除基因(tm1c),从而恢复基因功能。在tm1a的基础上,Cre的表达可以删除Neo和critical region从而变成lacZ标记的allele (tm1b)同时敲除基因;在tm1c的基础上,Cre的表达可以删除tm1c allele上的critical region而变成移码突变的tm1d,从而使该基因不表达。

Fig. 1 Knockout first targeting strategy based on mutant mouse ES cells