遗传 ›› 2007, Vol. 29 ›› Issue (4): 490-490―498.doi: 10.1360/yc-007-0490
高磊1,2,3, 郭素敏1, 崔永兰1,4, 诸葛强1, 黄敏仁1
1. 南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室, 南京 210037;
2. 中国科学院武汉植物园, 武汉 430074;
3. 中国科学院研究生院, 北京 100049;
4. 上海师范大学生命科学学院, 上海 200234
GAO Lei1,2,3, GUO Su-Min1, CUI Yong-Lan1,4, ZHUGE Qiang1, HUANG Min-Ren1
摘要:
忽地笑Raised Secondary Lateral Veins (RSLV)突变体平行脉间横向二级侧脉显著凸起, 生长不良, 雄蕊完全退化。本研究利用表达型噬菌体载体ZAP构建了野生型和突变体忽地笑叶片cDNA文库, 分别随机挑取cDNA克隆进行5′端测序, 共得到3,122条有效ESTs。利用这些ESTs序列, 选择非冗余基因, 设计512条70 mer的特异性序列为寡核苷酸探针, 制作芯片, 对忽地笑野生型和突变体叶器官进行基因表达谱分析。进一步采用实时定量PCR技术验证芯片实验结果, 最终确定所检测的基因中, 有5个基因在突变型和野生型间表达差异显著, 分别是韧皮部蛋白2 (phloem protein 2, PP2)、铁蛋白(ferritin)、果胶甲酯酶(pectin methyl esterases, PMEs), 以及叶绿素a/b结合蛋白和丙酮酸脱羧酶等。克隆获得了其全长cDNA, 并探讨了这些差异基因与忽地笑突变型形成的可能关系。