摘要： y.文阐述了美洲拟蝶抗冻蛋白基因在E. coli中表达的研究。用Hpa II酶切pCT5质片价晰
出抗冻蛋白基因片段，再经Bal引酶、绿豆核酸酶处理，井连接＿｛：Bgl 11接头，插人到、>RF-2龙达嘴
粒的B川II位点上，筛选出正确插入方向的转化子，称pORF-AF。并对pORF-AF质粒作昌部分限制
性酶切图谱，测定出插入基因的DNA序列，同时用SDS-聚丙烯队胺凝胶电泳分析检测插人基因，在
E. coli TK1046中的表达产物，发现布电泳图谱上有明显的融合蛋白带，分子是大于标准蛋i 一半乳
糖普酶是由大肠杆菌外膜蛋白F、抗冻蛋白和0-半乳糖营酶组成。融合蛋白含量占粉，的菌体提取蛋
白20％ 左右。
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