牛乳腺核基质附着区的克隆及其功能研究

遗传 ›› 2006, Vol. 28 ›› Issue (1): 31-35.

牛乳腺核基质附着区的克隆及其功能研究

杨瑞锋舒建洪李志艳刘金龙张涌*

(西北农林科技大学生物工程研究所杨凌,712100)

收稿日期:2004-10-10 修回日期:2005-01-06 出版日期:2006-01-10 发布日期:2006-01-10
通讯作者: 杨瑞锋

Molecular cloning and functional analysis of Bovine mammary gland matrix attachment regions

YANG Rui-Feng, SHU Jian-Hong, LI Zhi-Yan, LIU Jin-Long, ZHANG Yong

(Institute of Bio-Engineering, Northwest A & F University,Yang ling, Shaanxi 712100,China)

Received:2004-10-10 Revised:2005-01-06 Online:2006-01-10 Published:2006-01-10

摘要/Abstract

摘要： 从奶牛的全血中提取基因组DNA,参照GenBank已有序列,通过Primer5.0和Vector 7.0辅助设计一对引物,克隆了牛乳腺核基质附着区(BMRs)。利用生物学软件对其进行初步分析后，TA克隆于pMD－18T vector上。上下游引物5′端分别引入Kpn2Ⅰ和XhoⅠ酶切位点,将所得的BMRs克隆到pEGFP-C1的报告基因下游，构建成表达载体BE，脂质体法转染牛耳成纤维细胞。以转染pEGFP-C1的牛耳成纤维细胞作为对照，发现所克隆的BMRs功能明显，在消除位置效应、增强报告基因表达方面具有一定的作用。

关键词: 核基质附着区, 克隆, 细胞表达

Abstract: The bovine genomic DNA was extracted from bovine blood, then bovine mammary gland matrix attachment region (BMARs) was cloned using a pair of primers, which were designed based on the related sequences in GenBank through bio-software Primer5.0 and Vector7.0. Upon preliminary analysis with bio-software, BMARs was TA cloned into PMD－18 T vector. By means of adding Kpn2Ⅰand XhoⅠto 5’upstream of sensitive and antisensitive primers respectively, expressing vector BE was constructed after BMAR was cloned into the downstream of the reporter gene in pEGFP-C1. Bovine ear fibroblast cells were transfected by expressing vector BE with Lipofectamine.Compared with control bovine ear fibroblast cells transfected with pEGFP-C1, the effect of cloned BMR was apparent in dispelling position effect and enhancing gene expression.

中图分类号:

Q813
Q785

杨瑞锋，舒建洪，李志艳，刘金龙，张涌. 牛乳腺核基质附着区的克隆及其功能研究[J]. 遗传, 2006, 28(1): 31-35.

YANG Rui-Feng, SHU Jian-Hong, LI Zhi-Yan, LIU Jin-Long, ZHANG Yong. Molecular cloning and functional analysis of Bovine mammary gland matrix attachment regions[J]. HEREDITAS, 2006, 28(1): 31-35.

[1]	李亚楠, 张贤君, 张宁, 梁雅琳, 张宇星, 招华兴, 李紫聪, 黄思秀. 过表达组蛋白H3K9me3去甲基化酶对猪克隆胚胎发育的影响[J]. 遗传, 2023, 45(1): 67-77.
[2]	蒋婧, 赵安麒, 谢甜, 陈淑藯, 李劲松. 全基因组蛋白质的标签细胞和小鼠资源库建设[J]. 遗传, 2021, 43(7): 704-714.
[3]	赵利楠, 王娜, 杨国良, 苏现斌, 韩泽广. 基于单细胞靶向测序探究基因碱基突变的方法[J]. 遗传, 2020, 42(7): 703-712.
[4]	敖政, 陈祥, 吴珍芳, 李紫聪. 体细胞克隆猪发育异常研究进展[J]. 遗传, 2020, 42(10): 993-1003.
[5]	祝力骋,卢俊婉,王建,许腾,徐娟华. 肺炎克雷伯菌bla_CARB-2基因的分布及结构分析[J]. 遗传, 2018, 40(7): 593-600.
[6]	张丽珍, 张永, 胡景华, 王子龙, 曾志将. 中华蜜蜂酪胺受体基因克隆及表达分析[J]. 遗传, 2018, 40(2): 155-161.
[7]	杨德卫, 郑向华, 程朝平, 叶宁, 黄凤凰, 叶新福. 基于CSSLs群体定位和图位克隆水稻长芒基因GAD1-2[J]. 遗传, 2018, 40(12): 1101-1111.
[8]	于雪新,陈艾莉,李玥莹,刘丹,王前飞. 白血病的精准基因组医学研究与转化应用[J]. 遗传, 2018, 40(11): 988-997.
[9]	汪乐洋,黄海燕,吴强. 利用CRISPR/Cas9对基因组中高度同源DNA片段编辑多样性的遗传学研究[J]. 遗传, 2017, 39(4): 313-325.
[10]	敖政, 刘德武, 蔡更元, 吴珍芳, 李紫聪. 克隆哺乳动物的胎盘发育缺陷[J]. 遗传, 2016, 38(5): 402-410.
[11]	杨献伟,杨瑞馥,崔玉军. 细菌基因组同源重组：量化与鉴定[J]. 遗传, 2016, 38(2): 137-143.
[12]	李国玲, 钟翠丽, 倪生, 刘德武, 蔡更元, 李紫聪, 杨化强, 吴珍芳. 利用CRISPR/Cas9系统建立Xist基因敲除猪模型[J]. 遗传, 2016, 38(12): 1081-1089.
[13]	李利族, 韩丽鑫, 王金奎, 汪亮, 刘娣, 杨秀芹. 猪PILRA基因克隆及变异剪接体鉴定[J]. 遗传, 2015, 37(9): 926-931.
[14]	李志芳, 冯自力, 赵丽红, 师勇强, 冯鸿杰, 朱荷琴. 转几丁质酶和葡聚糖酶双价基因棉花对土壤细菌种群多样性的影响[J]. 遗传, 2015, 37(8): 821-827.
[15]	高磊,沈敏,甘尚权,杨井泉,张译元. 绵羊CCNG1基因克隆及表达分析[J]. 遗传, 2015, 37(4): 374-381.