2017年, 第4期
刊出日期:2017-04-20
中华仓鼠卵巢(Chinese-ha-mster ovary, CHO)细胞是目前生物制药产业中常用的宿主细胞,通过把外源目的基因稳定整合到CHO细胞基因组上的高表达位点,从而使目的基因高表达,实现重组蛋白的高产。为了保证重组CHO细胞的稳定生产,检测外源基因在CHO细胞基因组的整合状态成为必要要求。康柏西普(Conbercept)是一种利用CHO细胞生产的重组蛋白,康柏西普眼用注射液用于治疗湿性年龄相关性黄斑变性(AMD),其活性成分是由人血管内皮生长因子受体1中的免疫球蛋白样区域2、人血管内皮生长因子受体2中的免疫球蛋白样区域3和4,以及人免疫球蛋白Fc片段融合而成。利用
CHO细胞生产的康柏西普蛋白能够特异性结合VEGF-A的各种异构体、VEGF-B以及PlGF,抑制病理条件下的血管异常增生。荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是一种直观、灵敏、特异、安全的基因检测和定位技术,被广泛应用于细胞遗传学分析、遗传病诊断、基因图谱绘制等研究领。封面意指应用FISH技术,检测康柏西普基因在不同传代次数的CHO细胞染色体上的整合状态,结果显示经过连续传代19次,康柏西普基因仍然稳定的整合在宿主细胞的染色体上。详见师明磊、赖维莉和赵志虎等“应用荧光原位杂交技术检测康柏西普基因在CHO细胞染色体上的整合状态”一文(第326~332页)。
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