采用双标准曲线相对实时荧光定量PCR法, 分别以23℃常温对照组和6℃低温待测组的黑龙江鲤脑组织cDNA为模板, 以18S rRNA为内参基因, 检测26个候选基因的相对表达量。实验数据经显著性分析发现, 有5个候选基因在低温条件下表达量显著上升(P<0.01), 与对照组相 比它们的表达量分别上升了2.11倍、13.9倍、2.52倍、7.38倍和1.83倍, 基因功能比对结果表明其编码蛋白产物分别是脂肪酸链延伸蛋白、酰基辅酶A脱氢酶、转录起始因子IIB、肌醇-1-磷酸合成酶、血脑屏障HT7抗原; 有7个候选基因在低温下表达量分别下降了21.8%、25.9%、16.6%、23.7%、15.8%、16.3%、42.5%, 但对照组和待测组差异不显著(P>0.05), 基因功能比对发现它们主要参与抑制糖酵解, 促进细胞凋亡和干扰神经系统的重塑活动。上述低温下表达量显著上升的5个冷诱导候选基因的获得为今后进行不耐低温鱼类的基因工程育种提供了基因元件。

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