摘要：

基因组的精准编辑面临一个根本性矛盾：能够进行大片段整合的DNA重组酶依赖双链DNA（dsDNA）作为供体，而dsDNA在哺乳动物细胞中会激活以cGAS-STING为核心的先天免疫通路，导致强烈的细胞毒性，极大限制了其体内应用。2026年3月11日，美国麻省总医院Benjamin P. Kleinstiver团队在Nature杂志发表了题为“Immune evasive DNA donors and recombinases license kilobase-scale writing”的研究论文（doi: 10.1038/s41586-026-10241-z），提出将环状单链DNA（cssDNA）与重组酶联用，兼顾免疫逃逸与大片段整合两大需求。然而，重组酶识别位点天然需要双链结构，cssDNA本身无法被重组酶识别，二者兼容性构成核心技术壁垒。该团队从整合型单链DNA噬菌体中获得启发，开发了INSTALL策略，通过一段短寡核苷酸（PIP）退火至cssDNA的重组酶识别位点，形成局部双链的oDNA结构，在保留cssDNA免疫惰性的前提下使其被重组酶识别。在原代人T细胞、诱导多能干细胞及小鼠体内实验中，INSTALL均展现出远超传统dsDNA供体的整合效率与耐受性。在新生小鼠全身给药实验中，等质量dsDNA三日内100%致死，而INSTALL处理组小鼠全部存活，肝脏整合效率接近1%。这项研究从原核病毒中汲取灵感，系统性解决了非病毒大片段基因整合领域长期存在的免疫毒性难题，为遗传病的体内基因治疗开辟了新的技术路径。

推荐人：梁乐彤，卢大儒