遗传 ›› 1981, Vol. 3 ›› Issue (2): 37-39.

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琼脂糖凝胶电泳分离纯化和制备质粒DNA

郭三堆 郭兴华 陈乃用 贾士芳 门大鹏   

  1. 中国科学院微生物研究所,北京
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1981-03-28 发布日期:1981-03-28

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1981-03-28 Published:1981-03-28

摘要: 分离纯化质粒DNA,在遗传工程和质粒的 分子遗传学研究中是重要的一环。分离和制备 质粒DNA的方法很多,有:澳化乙锭密度梯度 祛[2-5]、两相法[6]、酸酚法[7][碱变性法[8]p、甲基化 白蛋白(MAK)柱层析法[9]硝酸纤维素法[10]、电 泳法[11]等,这些方法都各有所长。根据质粒的超 卷曲结构、开环结构和线状结构的不同,各个质 粒分子量大小的不同,以及质粒DNA与RNA 和染色体DNA在电泳中迁移率的不同,在我 们实验室的条件下,研制了一种琼脂糖凝胶电 泳分离纯化和制备质粒DNA装置。运用这种 装置,纯化制备了以下质粒: pBR322, pASI, pUB110、F}lac+proA+B+, pVA517A, pVA517B, pVA517C, pVA517D, pVA517E, pVA517F, pVA517G和pVA517H。并且对它们进行了电 镜观察,对其中纯化过的pBR322和pASI质粒 进行了转化实验,证明它们有生物活性。同时, 应用这种装置,可以一次分离具有不同分子量 大小的几种质粒,回收率约为85多。结果表明, 这种装置结构简单,操作方便,是纯化制备质粒 DNA的一种可用工具。