遗传 ›› 1987, Vol. 9 ›› Issue (5): 43-43.

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一种用于染色体观察的改良绒毛细胞直接制备法

刘启兰; 钟昌奇   

  1. 江苏省计划生育研究所,南京
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1987-09-28 发布日期:1987-09-28

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1987-09-28 Published:1987-09-28

摘要: 为弥补羊水检查时间过晚之不足,1984年 Simoni利用绒毛标本直接制备法观察染色体获 得成功,此后,即日益为人们所注目。我们改良 了绒毛细胞直接制备方法,以胶原酶代替乙酸 处理,对绒毛细胞直接制备法(简称乙酸法)和 改良法(简称胶原酶法)进行了比较。大致过程 如下: 取妊娠6-7周人流绒毛组织50mg左 右,严格挑选后,生理盐水洗净,移人含最终浓 度0.5,ug/ ml秋水仙素的RPMI 1640培养液中 孵育1小时(pH7.2, 370C),然后分成两份。一 份按乙酸处理法进行制片:(1)去除培养液,加 3m11.5外拘椽酸钠溶液低渗15分钟;(2)加人 数滴3:1的甲醇:冰乙酸预固定10分钟;(3)吸 弃固定液,重复固定巧分钟;(4)吸弃固定液, 加入1m160并乙酸水溶液,处理2分钟,即追加 纯甲醇2ml; (5)吸取细胞悬液于离心管内离心 (1500-1800rpm); (6)冰水滴片,风干,Giemsa 染色。另一份按改良的胶原酶法制备染色体,大 致如下:(1)弃培养液加人15ng/ml胶原酶4ml, 孵育15-20分钟(370C); (2)加人4m1生理盐 水,离心(1000rpm),分钟,弃上清液,经0.75% 氯化钾4 ml低渗20分钟(370C),用甲醇冰醋 酸固定液lml预固定后,依上法离心,弃上清 液;(3)甲醇冰醋酸(3:1)重复固定15分钟,混 匀后自然沉降,吸上层细胞悬液离心,如此重复 二次后,再固定15分钟,气干法制片。28例实 验结果见表1,无论是可数分裂相,还是完整分 裂相出现率,胶原酶法均比乙酸法为高,二者间 有显著差异。