遗传 ›› 1987, Vol. 9 ›› Issue (5): 44-48.

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哺乳类基因工程的一些实验操作 实验10X噬菌体DNA 体外包装

赵寿元   

  1. 复旦大学遗传学研究所,上海
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1987-09-28 发布日期:1987-09-28

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1987-09-28 Published:1987-09-28

摘要: 一、需用的菌株及其特性鉴定 1.菌株及其基因型 (1)大肠杆菌E. coli BHB2688,基因型为:N205 rec^一〔rimm"`9 clts, b2, red-, Earn, Sam/r.lo (2)大肠杆菌E. coli BHB 2690,基因型为: N205 recA- [rimm"9`. cIts, b2, red-. Dam, Sam/r]. (3)大肠杆菌E. coli K802,基因型为:hsdR+, hsdM+.} gal-, met-, SUPHO 2.鉴定clrs基因 (1) BHB 2688和BHB 2690各自接种在2只LB 培养基上。一只置32℃下培养,另一只置42℃下培 养。在32℃培养的平板上挑取单菌落,接种在LB培 养液中,32℃培养过夜。 (2)再将培养液中生长的细菌划线接种在2只 LB培养基上,分别置32℃和42℃下培养。如果细菌 只在32℃ 下生长,则可用于制备包装用的抽提物。 3.鉴定,cA基因 (1)在LB平板上,平行划线接种BHB 2688, BHB 2690和K802o (2)用厚纸遮住培养皿的一半,打开培养皿盖置 紫外线下照射。然后在犯℃下培养过夜。 (3)厚纸遮挡部分的培养基上,BHB2688和BHB 269。生长,紫外线照射的培养基上则不生长。K802 不受紫外线照射的影响都能够生长。