小鼠胚胎干细胞hprt基因的定位致变

遗传 ›› 1994, Vol. 16 ›› Issue (5): 1-5.

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小鼠胚胎干细胞hprt基因的定位致变

刘爱民;尚克刚

北京大学生物学系，北京100871

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:1994-10-10 发布日期:1994-10-10

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:1994-10-10 Published:1994-10-10

摘要/Abstract

摘要： 利用DNA的同源重组原理，通过基因打靶技术，在小鼠胚胎干细胞(ES细胞）中将pMC1-neo导人hprt座位，实现了基因组内指定基因的定位致变．通过电穿孔导人质粒pRV4.0线性化D^A，分别用G418与6-TG筛选HPRT^-突变子．经抗性检验及DNA印迹分析，证明得到了一株预期的定位转化细胞，转化效率为1.32 x10^-8载体的非同源序列对定位致变的效率和整合方式没有影响，由于采取了有效的措施，所获HPRT^- ES细胞株仍维持了未分化和二倍体状态，保留了胚胎干细胞的特性．

刘爱民，尚克刚. 小鼠胚胎干细胞hprt基因的定位致变[J]. 遗传, 1994, 16(5): 1-5.

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