番茄黄化曲叶病毒的快速分子检测

doi:10.3724/SP.J.1005.2012.00366

遗传 ›› 2012, Vol. 34 ›› Issue (3): 366-370.doi: 10.3724/SP.J.1005.2012.00366

番茄黄化曲叶病毒的快速分子检测

李常保¹, 崔彦玲¹, 张丽英¹, 李传友²

1. 北京市农林科学院蔬菜研究中心, 北京100097 2. 中国科学院遗传与发育生物学研究所, 北京100101

收稿日期:2011-10-05 修回日期:2011-11-04 出版日期:2012-03-20 发布日期:2012-03-25
通讯作者: 李常保 E-mail:lichangbao@nercv.org
基金资助:
国家公益性行业科研专项(编号：201003065), 国家高技术研究发展计划项目(863计划)(编号：2009AA10Z104), 北京市优秀人才项目、北京主要作物高效育种关键技术的合作研发项目和蔬菜高效育种技术研发与重大品种选育项目(编号：D11110000131102)(编号：2010DFB33740)资助

Molecular detection of tomato yellow leaf curl virus (TYLCV)

LI Chang-Bao¹, CUI Yan-Ling¹, ZHANG Li-Ying¹, LI Chuan-You²

1. Beijing Vegetable Research Center, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Science, Beijing 100097, China 2. Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China

Received:2011-10-05 Revised:2011-11-04 Online:2012-03-20 Published:2012-03-25

摘要/Abstract

摘要： 番茄黄化曲叶病毒是当前世界范围内危害番茄生产的毁灭性病害。文章针对番茄黄化曲叶病毒全基因组序列的特异区段自主设计了1对特异性PCR引物(上游引物TYLCV-F：5′-ACGCATGCCTCTAATCCAGTGTA-3′, 下游引物TYLCV-R：5′-CCAATAAGGCGTAAGCGTGTAGAC-3′), 依据PCR扩增特异片段543 bp的有无可以快速、准确、高效、特异地检测出是否感染了TYLCV病毒, 这项技术可以方便地应用到工厂化育苗的带毒性检测、蔬菜大规模生产中植株发病情况的快速检测以及抗病毒育种, 从而为蔬菜安全可持续生产提供科技支撑。

关键词: 特异引物, 分子检测, 番茄黄化曲叶病毒

Abstract: Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) is currently considered as one of the most devastating viruses in cultivated tomatoes (Solanum lycopersicum) worldwide. We reported here the development of a PCR-based method to quickly detect TYLCV using the primer pairs (TYLCV-F: 5'-ACG CAT GCC TCT AAT CCA GTG TA-3' and TYLCV-R: 5'-CCA ATA AGG CGT AAG CGT GTA GAC-3'), which was designed based on the genome sequence of TYLCV. A TYLCV-specific band of 543 bp was amplified from infected tomato plants. This protocol provides a rapid, reliable, and sensitive tool for molecular detection and identification of TYLCV in the industrial seedling and virus resistance breeding to facilitate safe and sustainable production of tomato.

Key words: tomato yellow leaf curl virus (TYLCV), specific primer, molecular detection

李常保，崔彦玲，张丽英，李传友. 番茄黄化曲叶病毒的快速分子检测[J]. 遗传, 2012, 34(3): 366-370.

LI Chang-Bao, CUI Yan-Ling, ZHANG Li-Ying, LI Chuan-You. Molecular detection of tomato yellow leaf curl virus (TYLCV)[J]. HEREDITAS, 2012, 34(3): 366-370.

参考文献

[1] 蔡健和, 秦碧霞, 朱桂宁, 黄福新, 陈永惠, 李焜华. 番茄黄化曲叶病毒病在广西爆发的原因和防治策略. 中国蔬菜, 2006, (7): 47-48.
[2] 何自福, 虞皓, 毛明杰, 罗方芳, 林奕韩, 王穗涛. 中国台湾番茄曲叶病毒侵染引起广东番茄黄化曲叶病. 农业生物技术学报, 2007, 15(1): 119-123.
[3] 赵统敏, 余文贵, 周益军, 季英华. 江苏省番茄黄化曲叶病毒病(TYLCD)的发生与诊断初报. 江苏农业学报, 2007, 23(6): 654-655.
[4] 吴永汉, 张纯胄, 许方程, 李芳芳, 陈为康, 卢启强, 夏万青. 温州地区番茄曲叶病毒病发生与防治. 中国蔬菜, 2007, (5): 57-58.
[5] 于力, 朱龙英, 万延慧, 杨少军, 张辉, 朱为民. 上海地区番茄黄化曲叶病毒病的鉴定及嫁接接种法研究. 基因组学与应用生物学, 2009, 28(1): 115-118.
[6] Zhang H, Gong HR, Zhou XP. Molecular characterization and pathogenicity of tomato yellow leaf curl virus in China. Virus Gen, 2009, 39(2): 249-255.
[7] 李常保, 柴敏, 李季, 郑建秋. 北京番茄黄化曲叶病毒病的发生及分子检测. 中国蔬菜, 2010, (1): 28-30.
[8] Morilla G, Janssen D, García-Andrés S, Moriones E, Cuadrado IM, Bejarano ER. Pepper (Capsicum an-nuum) is a dead-end host for tomato yellow leaf curl virus. Phytopathology, 2005, 95(9): 1089-1097.
[9] 叶剑, 青玲, 周雪平. 与中国番茄黄化曲叶病毒伴随的DNAβ分子βC1缺失突变体介导的交叉保护作用初步研究. 浙江大学学报 (农业与生命科学版), 2006, 32(5): 479-482.
[10] Del Sal G, Manfioletti G, Schneider C. The CTAB-DNA precipitation method: a common mini-scale preparation of template DNA from phagemids, phages or plasmids suitable for sequencing. Biotechniques, 1989, 7(5): 514-520.
[11] 王伟伟, 朱长青, 刘小花, 陈昆松, 徐昌杰. 番茄叶片基因组DNA快速制备技术及其在基于实时荧光定量PCR的转基因检测中的应用. 遗传, 2011, 33(9): 1017-1022.

编辑推荐

Metrics

www.chinagene.cn
备案号：京ICP备09063187号-4
总访问:,今日访问:,当前在线:

番茄黄化曲叶病毒的快速分子检测

Molecular detection of tomato yellow leaf curl virus (TYLCV)

PDF (PC)

可视化

被引次数

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 3

编辑推荐

Metrics

[1]	栾丽，陈英，王兴，龙文波，刘玉花，涂升斌，孔繁伦，李万明，肖小余. 同源四倍体水稻籼型突变体Wx基因序列分析及特异识别分子标记的建立[J]. 遗传, 2008, 30(2): 209-216.
[2]	刘博，苏乔，汤敏谦，袁晓东，安利佳. 应用于染色体步移的PCR扩增技术的研究进展[J]. 遗传, 2006, 28(5): 587-595.
[3]	龚鹏，沈佐锐. PCR为基础的分子技术检测沃尔巴克氏体的研究进展[J]. 遗传, 2002, 24(2): 207-210.