用长PCR方法检测含有较大缺失或插入的DNA大片段

遗传 ›› 1998, Vol. 20 ›› Issue (3): 8-10.

用长PCR方法检测含有较大缺失或插入的DNA大片段

武辉; 张思仲 WU Hui;ZHANG Si-zhong

华西医科大学附属第一医院医学遗传研究室, 成都 610041 Department of Medical Genetics,West China University of Medical Sciences,Chengdu 610041

收稿日期:1900-01-01 出版日期:1998-06-10 发布日期:1998-06-10

Long PCR Amplification of Fragment with Large Deletion orInsertion Allelic

Received:1900-01-01 Online:1998-06-10 Published:1998-06-10

摘要/Abstract

摘要： 选择位于19q13.3上的人类肌张力蛋白激酶基因(myotonin protein kina se gene,MT-PK)为靶基因(基因全长为14kb),以G+C含量较高且含有1kb缺失或插入,由基因第8内含子中的Alu±1kb的5'端至第15外显子3'非编码区中的CTG重复序列3'端,即两者间的距离为5.3kb的DNA片段为待扩增靶序列,通过优化DNA聚合酶的组合和反应缓冲体系,点考查了含有Alu-1k b和Alu+1kb缺失或插入的MT-PK等位基因片段共扩增的长PCR方法。本方法可有效地同步扩增6.5kb和5.5kb两个等位基因片段,对6.5kb和5.5kb纯合等
位片段则达到了更有效的扩增。

关键词: 缺失和插入, 等位基因共扩增, 长PCR, 线粒体DNA, 牦牛, 限制性片段长度多态性, 遗传多样性

Key words: Mitochondrial DNA, Genetic diversity, Yak, RFLP

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