遗传 ›› 2008, Vol. 30 ›› Issue (8): 1043-1050.doi: 10.3724/SP.J.1005.2008.01043
任洪林1, 2; 徐丹丹1; 乔琨1; 蔡灵1; 黄伟滨1; 张鼐1; 王克坚1
REN Hong-Lin1,2; XU Dan-Dan1; QIAO Kun1; CAI Ling1; HUANG Wei-Bin1; ZHANG Nai1; WANG Ke-Jian1
摘要: 以雌性杂色鲍为对象, 以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌, 利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSH cDNA文库。随机挑取生长菌落110个克隆子, 进行菌液PCR鉴定, 计算文库重组率为98.18%, 文库容量为1.37×106 pfu。将重组子测序, 经BLAST一致性搜索比对分析, 有一重组片段含有穿孔素(Perforin)保守结构域, 为巨噬细胞表达蛋白(MEP)类穿孔素部分cDNA序列, 片段大小为1 551 bp, 连续编码517个氨基酸残基, 申请GenBank登录号为EU272049。经半定量PCR和荧光定量PCR差异显示分析, 发现在细菌感染状态下MEP基因在血淋巴细胞中存在明显的上调表达现象。