苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)是一类革兰氏阳性菌, 主要特征是在形成芽胞的过程中伴有杀虫晶体蛋白组成的伴胞晶体的形成。菌株YBT-020属于苏云金芽胞杆菌幕虫亚种(Bacillus．thuringiensis serovar．Finitimus), 该菌株形成的伴胞晶体定位于芽胞外壁和芽胞衣之间, 当母细胞裂解后伴胞晶体和芽胞不会分离, 这种特殊的表型被称为晶胞粘连(Spore-Crystal Association, 简称SCA)。质粒消除和接合转移实验, 证明菌株YBT-020晶胞粘连表型由其两个内生大质粒控制。为了克隆到控制晶胞粘连表型的基因, 开展了菌株YBT-020的质粒克隆工作。通过构建穿梭细菌人工染色体(BAC)文库, 设计质粒特异引物筛选文库, 选取阳性克隆子末端测序, 随后通过染色体步移, 最终获得几个克隆子能够重叠覆盖整个质粒序列。质粒克隆策略详见本期第1141页戚军良、孙明等人的论文“苏云金芽胞杆菌大质粒pBMB28的克隆”, 结合同期开展的基因组测序工作最终获得完整的质粒序列。本期封面图中的圈图为菌株YBT-020其中一个内生质粒pBMB28的示意图。质粒pBMB28的克隆为控制晶胞粘连基因的鉴定奠定了基础, 同时也为研究质粒的复制、稳定遗传机制, 以及该质粒在蜡状芽胞杆群的分布和进化等提供研究材料。 ...[展开]